产品Product

Vaccinia Capping System

500U×5 / ¥6075


目录号:M062-YH01-01B


产品描述:


牛痘病毒加帽体系利用牛痘病毒加帽酶及相关组分,将7-甲基鸟苷帽结构(m7Gppp,Cap0)加到 RNA 的 5´ 末端。在真核生物中,该结构与mRNA 的稳定、转运和翻译密切相关。使用酶促反应为RNA 加帽是一种简单有效的方法,能显著改善用于体外转录、转染和显微注射的RNA 的稳定性和翻译能力。这种酶由两个亚基(D1 和D12)组成 (图1a),D1 亚基执行RNA三磷酸酶和鸟苷转移酶的功能,D12 亚基执行鸟嘌呤甲基转移酶的功能,它们对于添加一个完整的Cap0 结构m7Gppp5´N 都是必须的(图1b)。

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  产品用途:


体内或体外翻译前 mRNA的加帽和 mRNA的 5’末端标记。     


产品性能:


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注意事项:   


1. 用于加帽反应的 RNA在使用之前应进行纯化并溶解于 无核酸酶 水。溶液中不能含有 EDTA和盐。

2. 在配置反应体系时,可以加入 0.5 μl的 RNase 抑制剂 E125 Murine Novoprotein),同时去掉等体积的 RNase-free 水。

3. 在与加帽酶反应之前加热 RNA可以去除 转录产物 5´的二级结构。如果 转录产物 的 5´端结构复杂,可以把加热时间延长至 10分钟。

4. SAM在 pH 7–8, 37°C条件下不稳定,需要在反应开始之前新鲜配置。可以事先计算好 SAM的用量,在反应开始前把分装的32 mM的储备液稀释成 2 mM的工作液。为避免 SAM降解,该工作液需要保存于冰上。

5. 如果已知 转录产物 的 5´端结构复杂,反应时间可延长至 60分钟以提高加帽效率。

6. 在标记 5´端时, GTP储备液应稀释到 mRNA浓度的 1–3倍。



For research use only.


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